SK-HEP-1


 * ¿Que son las células SK-HEP-1?**

Las células SK-HEP-1 son un tipo de linea celular endotelial que proviene de humanos que padecen adenocarcinoma de hígado. Esta línea celular se considera inmortal pues no sufre el llamado proceso de senescencia, el cual depende de la presencia o no de telomerasa que va recuperando los telómeros en cada división, evitando que, una vez agotados, por apoptosis muera la célula. Por tanto, al no sufrir este proceso de senescencia gracias a la telomerasa activa cabe denominarla línea celular inmortal.
 * Imagen 1.** Cultivo celular de SK-HEP-1, a la izquierda baja densidad, a la derecha alta densidad.[1]


 * Historia**

Esta línea celular fue establecida en 1971 con origen en un carcinoma hepático. La línea fue descrita morfológicamente por Fogh and Trempe en 1975, que fueron quienes depositaron la línea celular. Aún procediendo de un carcinoma hepático, se realizaron estudios de proteómica para conocer los productos proteicos de SK-HEP-1 y descubrieron que no hay genes específicos de células hepáticas en esta línea. Se observó una producción de alfa-1 antitripsina y complemento (C3), los cuales no son los esperados para una célula hepática. Estos productos secretados se compararon con otras células del cuerpo humano y se pudieron correlacionar con las células endoteliales de las venas del cordón umbilical(HEC). Así pues se aisló de un paciente caucásico de 52 años de edad que presentaba un hepatoma en el epitelio glandular.

 **Características generales**

 SK-HEP-1 presenta aneuploide humana con recuento en el rango hipotriploide, es decir, el número de cromosomas difiere del silvestre. En su cariotipo encontramos los cromosomas N1, N13, N14, N15 y N16 insuficientemente representados, mientras que los N7, N12, N17 sobreexpresados.

 Se han identificado 8 marcadores cromosómicos: del(1)(q21), der(1)t(1;2)(p36;q21), ?tdic(1;12)(p36;q24),  ampl.t(4pter--->4q11::HSR::4q12--->4q24::HSR?::4q26--->4q35::2q15--->2pter), 13p+, 13p++, 14p+, t(14q15q), iso(14q), 19q+, del(3)(p14p24), 15p+.

 Las células SK-HEP-1 expresaban casi todos los marcadores de células madre mesenquimales (MSC), como CD9, CD10, CD13, CD29, CD49d, CD54, CD71, CD73, CD146,CD166, CD90, CD44, CD105, HLA-ABC y fosfatasa alcalina (ALP). Aunque MSC y las células endoteliales comparten algunos marcadores de superficie, las células endoteliales no se pueden diferenciar en linajes adiogénicos y osteogénicos. Sin embargo, estudios demuestran que las células SK sí podrían diferenciarse en estos dos linajes celulares, propiedad característica de MSC.

 A pesar de presentar casi todos los genes MSC, las células SK no expresan albúmina o alfa fetoproteína (linaje hepático), factor miogénico 5 (MYF5), miogenina (MYOG) y desmina (linaje de mioblastos), proteína ácida fibrilar glial (GFAP, linaje de células estrelladas hepáticas) ), CK14 y CK17 (linaje celular de mioepitelios), o CD34, y CD45 (linaje celular hematopoyético); y además, no son detectables otros marcadores de células endoteliales como CD34, CD31, CD144, E-selectina y CD106 / ICAM-1.

 Por lo que si las células SK son de origen endotelial como se dijo en un primer momento, seria debido a que los progenitores endoteliales transformados oncogénicamente podrían ser transdiferenciados en células mesenquimales después del golpe oncogénico, similar a lo que ocurre durante el desarrollo embrionario normal. Sin embargo, según datos mas recientes, lo que se sugiere es la posibilidad de que las células SK puedan originarse a partir de células del pericito o perivasculares. Ya que los pericitos y las células progenitoras endoteliales (EPC) comparten muchas propiedades; por ejemplo, provienen de origen mesenquimal, comparten muchos marcadores de superficie, forman estructuras tubulares in vitro, las cuales pueden ser inhibidas por los mismos inhibidores.

 **Propiedades para su mantenimiento**

 SKHEP-1 células de adenocarcinoma de hígado humano (American Type CultureCollection, Rockville, MD) se mantuvieron en MEM suplementadocon sales de Earle, l-glutamina y 10% de FBS. Las células crecieron hasta el 80%confluente en un medio que contenga 10% de SFB, y luego se cambió durante 12 horas aMEM libre de suero. El medio se aspiró y las células se cultivaron enMEM libre de suero con o sin varias hormonas, como se describe en eltexto. Los medios condicionados (CM) se recogieron y centrifugaron a 1000 3g durante 10 min para eliminar los restos celulares. El CM cosechado por triplicadolos pozos dentro de cada experimento fueron agrupados y almacenados a 270 C hasta ensayo.

 **¿Como podemos usar las SK-HEP-1 en investigación?**

 La restauración de miR-122, en células SK-HEP-1 metastásicas redujo significativamente la migración in vitro, la invasión y el crecimiento independiente del anclaje, así como la tumorogénesis in vivo, la angiogénesis y la metástasis intrahepática en un modelo ortotópico de cáncer de hígado. Por lo que miR-122, micro ARN supresor tumoral que afecta la metástasis intrahepática del carcinoma hepatocelular por supresión de la angiogénesis, ejerce parte de su acción a través de la regulación de ADAM17 teniendo un efecto de gran alcance en la célula. Usando la regulación descendente concomitante de sus dianas, incluido ADAM17, se crea una estrategia terapéutica racional basada en miR-122 que resulta beneficiosa para los pacientes con carcinoma hepatocelular. El factor de crecimiento de fibroblastos básico humano (bFGF) es un mitógeno polipeptídico angiogénico presente en una amplia variedad de tejidos derivados de mesodermo y neuroectodermo. Una proteína bFGF aislada de placenta humana contiene dos aminoácidos adicionales NH2-terminal para el iniciador metionina. Presentamos aquí que la línea celular humana SK-HEP-1 coexpresa cuatro formas moleculares (17.8, 22.5, 23.1 y 24.2 kDa) de bFGF. Según la proteína bFGF se inicia por traducción del codón de metionina o se inicia en condiciones diferentes.

 Se han descrito un sistema que permitirá la generación de mutantes que producen solo una forma molecular específica de bFGF. Estos mutantes se pueden utilizar para determinar la ubicación intracelular y la función fisiológica de las diferentes formas moleculares de bFGF.

 Una proteína de 17.500 daltons que estimula la producción del activador de plasminógeno en células endoteliales capilares bovinas cultivadas se ha purificado a partir de un lisado de células de hepatoma humano SK-Hep-1 usando cromatografía de afinidad de heparina y cromatografía rápida de intercambio iónico proteína-líquido.La identificación de una línea de células tumorales humanas que produce FGF básico in vitro permite el estudio de la síntesis, procesamiento y secreción de esta molécula. Además, las células SK-Hep-1 se pueden utilizar como fuente de ARNm de FGF básico, haciendo la clonación de su gen más factible.

<span style="background-color: rgba(0,0,0,0); color: #000000; font-family: Arial,Helvetica,sans-serif; font-size: 14.6667px; text-decoration: none; vertical-align: baseline;"> **Descubrimientos mas importantes gracias a SK-HEP-1**

<span style="color: #212121; font-family: Arial,Helvetica,sans-serif; vertical-align: baseline;"> Gracias al uso de la línea celular SK-HEP-1 se consiguió demostrar por primera vez que la transformación de genes específicos se puede conseguir usando un complejo transportador de DNA soluble, un sistema basado en el proceso de endocitosis mediado por receptores, específico para cada tipo de célula. Este complejo permite la inserción de genes en células, lo que antes era muy complicado y ahora es muy útil en el estudio de regulación de genes “in vivo”.

<span style="color: #212121; font-family: Arial,Helvetica,sans-serif; vertical-align: baseline;"> El gen (HSE1) de una biblioteca de cDNA de placenta humana que codifica una nueva proteína que exhibe actividad de heparanasa, a través de secuencias peptídicas derivadas de heparanasa purificada aislada de células de hepatoma SK-HEP-1 humanas. La proteína HSE1 fue detectable en medios acondicionados, pero también se asoció con la fracción de membrana después de la lisis celular. Se demostró que el producto del gen HSE1 muestra actividad de heparanasa mediante la escisión específica de un sustrato de heparán sulfato marcado de una manera similar a la proteína nativa purificada.

<span style="color: #212121; font-family: Arial,Helvetica,sans-serif; vertical-align: baseline;">.

<span style="background-color: rgba(0,0,0,0); color: #000000; font-family: Arial,Helvetica,sans-serif; font-size: 14.6667px; text-decoration: none; vertical-align: baseline;"> **Referencias**

<span style="background-color: rgba(0,0,0,0); color: #000000; font-family: Arial,Helvetica,sans-serif; font-size: 14.6667px; text-decoration: none; vertical-align: baseline;">