HeLa

=**HeLa**=

Las células HeLa proceden originariamente del epitelio del cérvix, concretamente del endocérvix. Este tejido está formado en su mayoría por estroma fibromuscular denso y una superficie repleta de hendiduras profundas revestidas por epitelio cilíndrico simple secretor de moco. Dicho epitelio perteneció a la paciente Henrietta Lacks, cuyas células fueron infectadas por el virus del papiloma humano (VPH), adquiriendo así malignidad y por tanto inmortalidad, siendo de gran uso en investigación científica. El establecimiento de la primera linea celular humana HeLa se realizó en el año 1952 por Gey et al. toc

**Breve recuerdo histórico**
El 1 de Febrero de 1951 Henrietta Lacks, una mujer afroamericana, acudió al hospital Johns Hopkins (Baltimore, Maryland), donde se le realizó una biopsia que permitió diagnosticarle una lesión en el cuello uterino, llamado carcinoma intraepitelial. La apariencia del tumor era diferente en comparación a los diagnosticados hasta entonces. En 1952 George Gey y su equipo establecieron, sin consentimiento de la paciente, la primera línea celular humana estable, siendo presentado en un congreso sin que ellos supieran las repercusiones que esto pudiera llegar a tener. Henrietta Lacks murió el 4 de Octubre de 1951. Si el lector desea ampliar más información sobre la vida de Henrietta Lacks y el contexto en el que se descubrieron las células HeLa os recomendamos consultar uno de los primeros documentales que se grabaron en los años 90 por Adams Curtis para la BBC Británica, leer el libro de //La vida inmortal de Henrietta Lacks//, de la periodista Rebecca Skloot, o visualizar próximamente la película adaptada de dicho libro protagonizada por Oprah Winfrey, cuyo rodaje se prevé para el verano de este 2016.

**Caracterización de la linea celular**
La línea celular HeLa posee una dotación cromosómica comprendida entre 72 y 82 cromosomas debido a la alta inestabilidad genética que presentaron en su momento. La mayoría de ellas son triploides e incluso tetraploides. A pesar de tan elevada alteración genética, las células HeLa cuentan actualmente con una alta estabilidad genética puesto que presentan 18 de los 20 marcadores empleados para su identificación. En un estudio realizado previamente en el año 1969, se demostró que dentro de la variabilidad cromosómica, las células con 73 cromosomas presentaban la mayor frecuencia dentro de la población celular. En cuanto a la morfología, siendo esta típicamente epiteloide, las células HeLa pueden presentar 2 morfologías dependiendo de la fase del ciclo celular en el que se encuentren y del tipo de medio en el que se cultiven. Si las células están en fase de mitosis presentaran una morfología redondeada (imagen inferior) mientras que si se encuentran en fase de crecimiento, adquieren una morfología de "huevo frito". La morfología puede variar dependiendo de si el medio en el que se cultivan es de origen biológico "Feeder layer" o no (grupos sulfonato o aminas). Asimismo, la forma celular de esta línea se ve influida por la densidad del cultivo, presentándose más estiradas si disponen de espacio para seguir creciendo o más restringidas cuando se encuentran en confluencia. En referencia a la contaminación de cultivos, algo muy habitual es la contaminación cruzada con otros tipos celulares. Ocurre esto, especialmente con las células HeLa, ya que presentan un tiempo de doblaje rápido (D T : 24 horas aproximadamente) y sus requerimientos nutricionales son menos exigentes que para el resto de líneas celulares. Existe constancia de tal efecto, ya que, de hecho, en un estudio de 1968 se observó que entre un 10-20% de líneas celulares cultivadas //in vitro// estaban contaminadas. Muchos laboratorios han utilizado las células HeLa para sus investigaciones por ser la primera línea celular humana estable, es por ello que han sido bien caracterizadas, lo que conllevó a que numerosas técnicas y herramientas se desarrollaran originalmente utilizando esta línea celular y por ende están optimizadas y no necesariamente funcionan bien con otras líneas celulares.

**Requerimientos para su mantenimiento**
Las células HeLa fueron cultivadas por primera vez en un medio base con plasma de pollo, extracto de embrión bovino y suero del cordón umbilical humano. Fundamentalmente, hoy en día, el medio base por excelencia más empleado es el DMEM ([|Dulbecco's Modified Eagle Medium]). A este medio base se le añaden aditivos como suero bovino fetal normalmente al 10%, ya que contiene todos los elementos necesarios para el crecimiento celular. También, un requisito fundamental para su cultivo es adicionar al medio una concentración adecuada de piruvato, para favorecer el correcto funcionamiento del ciclo de Krebs. Además, se deben añadir antibióticos en una mezcla de penicilina y estreptomicina para evitar el crecimiento de bacterias. Por otro lado, es necesario adicionar al medio L-glutamina para favorecer el metabolismo de estas células en cultivo, debido a que el metabolismo de éstas se ve modificado en condiciones anaeróbicas. A parte de de todos estos elementos es necesario añadir glucosa al medio. Los requerimientos de aminoácidos que presentan las células HeLa para su cultivo son muy similares a los requerimientos que necesita un fibroblasto de ratón. Los aas más importantes son la isoleucina, leucina, lisina, arginina, histidina, cisteína, tirosina, metionina, fenilalanina, valina, treonina y triptófano. Estos requerimientos ya los cubre el DMEM. En cuanto a las vitaminas, cabe destacar que existen 7 vitaminas que han sido identificadas como necesarias para el cultivo de células HeLa, siendo estas: el ácido fólico, la nicotinamida, el pantotenato, la tiamina, el pirodoxal, la riboflavina y la colina. Del mismo modo, vienen ya incluidas en la composición del medio base DMEM.

Principales usos y descubrimientos
**Principales usos de las células HeLa****:**
 * Investigación en los mecanismos de infección y transducción de ciertos virus.
 * Testación de compuestos antitumorales.
 * Estudio de mecanismos de comunicación en células tumorales.
 * Estudio del mecanismo de apoptosis celular
 * Utilización de microARNs con sus dianas para suprimir tumores.
 * Estudios sobre la estructura tridimensional de proteínas relacionadas con enfermedades degenerativas.
 * Estudios de las células cancerígenas.


 * Principales descubrimientos:**


 * Descubrimiento de la vacuna contra la poliomielitis.
 * Producción de apoptosis por el virus Oropouche en las células HeLa.
 * Papel de la proteína E2 en el ciclo de VPH en relación a la apoptosis.
 * Potencial antitumoral de Phenylbenzopyrones.
 * Producción de apoptosis en lineas celulares de cáncer por el virus //Canine// //distemper//.
 * Efecto in vitro de las ficobilinas en el tratamiento del carcinoma cérvico uterino.
 * Termotolerancia inducida a una temperatura moderada que alivia el choque inducido por calor y la apoptosis en las células Hela.

Hasta la fecha, infinidad de estudios científicos se han apoyado en el uso de las células HeLa, de tal forma que buena parte del desarrollo de algunas disciplinas como la biomedicina y genética moderna, no habrían sido posibles sin esta línea celular. Una de las primeras cosas que se aprende en un laboratorio de cultivos celulares, es que es muy difícil crecer la mayoría de las células humanas durante un periodo prolongado. Por ello, el uso de estas células es de suma relevancia ya que “desafían la muerte” pudiendo ser cultivadas continuamente en condiciones de laboratorio. Esta propiedad significa que los laboratorios de todo el mundo pueden tener acceso a estas células, al igual que elaborar un protocolo de estandarización experimental. Además de tener otras líneas celulares disponibles, Hela sigue siendo la línea celular más ampliamente utilizada en la investigación biomédica. El primer trabajo que se publicó basado en las células HeLa trataba sobre la propagación del virus de la poliomielitis y fue publicado en mayo de 1953, firmado por William Scherrer, Jerome Syverton y George Gey, de la Universidad de Minnesota en Minneapolis y del Hospital Johns Hopkins de Baltimore. En este artículo se refleja la gran importancia de las células HeLa, las cuales supusieron una gran revolución para la biomedicina, ya que contribuyeron a la cuantificación y producción de virus, así como a la medición de anticuerpos de la poliomielitis. Gracias al trabajo de Gey con el virus de la polio, Jonas Salk utilizó las células HeLa para ensayar la primera vacuna contra esta enfermedad. Asimismo, estas células han servido para la comprensión de los virus (sus rutas de acción y la expresión de proteínas asociadas). En referencia a los antecedentes de las investigaciones sobre el tema y sobre la bases de esta línea celular, cabe destacar algunos de los usos aplicados al ámbito científico. Bien es sabido que la apoptosis es un mecanismo conservado evolutivamente y es activado por una gran variedad de estímulos extracelulares e intracelulares. En este sentido y de forma práctica se han estudiado los mecanismos de apoptosis inducida por Oropouche (OROV) en las células HeLa. La infección in vitro con este virus provoca la apoptosis mediante una ruta intracelular que implica a las mitocondrias y la síntesis de proteínas que acabará en el desprendimiento de la envoltura del virus y su replicación. En cuanto al estudio de la comunicación celular usando células HeLa deficientes en comunicaciones Gap, se han transfectado DNAs que codifican para una serie de conexinas. Comparando así la permeabilidad de diferentes compuestos, mediada por esas conexinas. Como comentamos anteriormente, las células HeLa también han jugado un papel fundamental en la expresión de ciertas proteínas víricas. Tal es el caso del papilomavirus donde la proteína E2 juega un papel importante en su ciclo viral. Esta proteína regula tanto la transcripción como la replicación del genoma vírico. La expresión de esta proteína y su posterior unión a los elementos reguladores del DNA reprimen la transcripción de un oncogén cuyo producto degradaría la proteína conocida como "guardián del genoma" P53. En aquellas células donde está presente E2 se da la apoptosis celular. Alternativamente, una expresión inadecuada de los microARNs se asocia a fenómenos carcinógenos, de tal modo que mutaciones oncogénicas de miR-143 (uno de los mayores implicados en la génesis y progresión de los cánceres humanos) produce este efecto. Mediante su expresión adecuada en la línea celular HeLa se ha demostrado que suprime la proliferación del cáncer de útero. Es evidente que el uso de esta línea celular es muy variopinto. Finalmente destacar su utilización para el estudio de estructuras tridimensionales de proteínas (como la α-sinucleína ) relacionadas con enfermedades degenerativas, así como la testación de compuestos antitumorales, o incluso estudios básicos sobre las células tumorales.

Vídeos interesantes sobre HeLa
media type="youtube" key="22lGbAVWhro" width="560" height="315"

media type="youtube" key="XSOjy906MuQ" width="560" height="315"

media type="youtube" key="d7SuAqPPPro" width="560" height="315"

Referencias bibliográficas
 El primer trabajo que se publicó basado en las células HeLa trataba de la propagación del virus de la poliomielitis y se publicó en mayo de 1953, firmado por William Scherrer, Jerome Syverton y George Gey, de la Universidad de Minnesota en Minneapolis y del Hospital Johns Hopkins de Baltimore. En este artículo se refleja la gran importancia de las células HeLa que supusieron una gran revolución para biomedicina ya que contribuyeron a la cuantificación de virus de la poliomielitis, la medición de anticuerpos de la poliomielitis y la producción de virus. Gracias al trabajo de Gey con el virus de la polio, Jonas Sal (articulo) utilizó las células HeLa para ensayar la primera vacuna contra esta enfermedad.