A549

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= = =**ÍNDICE** =

= =
 * ====**Historia**====
 * ====**Organismo y tejido de origen**====
 * ====**Requerimientos para el mantenimiento**====
 * ====**Características especiales**====
 * **Análisis citogenético**
 * **Morfología y características**
 * ====**Principales usos en investigación o usos clínicos**** Descubrimientos importantes **====
 * ====**Bioseguridad**====
 * ====**Almacenamiento y criopreservación**====
 * ====**Proliferación de la línea celular A549 de carcinoma de pulmón humano** ====
 * ** Bibliografía **

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=**HISTORIA**=

La línea celular A549 fue mantenida y desarrollada por D.J. Giard en 1972 en colaboración con otros investigadores. A continuación podemos ver parte del artículo presentado por el autor y su equipo. En esa época había dificultad para poder cultivar células tumorales, por lo que fue un gran avance en el campo del cultivo celular.



(enlace al artículo original)

=**TEJIDO Y ORGANISMO DE ORIGEN **=

Estas células fueron extraídas de un varón de raza caucásica de 58 años con cáncer de pulmón, concretamente de un carcinoma de los alvéolos.

=**REQUERIMIENTOS PARA EL MANTENIMIENTO**=


 * RPMI-1640 suplementado con:
 *  10% SBF (Suero Bovino Fetal)
 * 1x PSN, cuyas concentraciones finales son
 * 50 µg/ml Penicillina
 * 50 µg/ml Streptomicina
 * 100 µg/ml Neomicina
 * 0.2 mg/ml L-Glutamina

=**CARACTERÍSTICAS ESPECIALES DE ESTA LÍNEA**=

__Análisis citogenético __
La línea celular es hipotriploide con un número de cromosomas modal de 66, que se produce en el 24% de las células. modal número 64 y 67 es relativamente común con ploidías más altas que se producen a un ritmo poco frecuente (0,4%)

Hay 6 marcadores presentes en una sola copia en todas las células. La mayoría de las células tenían dos cromosomas X y dos cromosomas Y. Sin embargo, uno o los dos cromosomas Y se perdieron en el 40% de las 50 células analizadas. Los cromosomas N2 y N6 tenían una sola copia por célula; y N12 y N17 por lo general tenían 4 copias.



Nota: //La información citogenética se basa en la célula stock en la ATCC, pero existe inestabilidad citogenética y el numero de cromosomas puede variar.//

__Morfología y características de las células A549 __
Las células A549 son células epiteliales basales alveolares humanos. Estos son escamosas en la naturaleza y responsable de la difusión de sustancias, tales como agua y electrolitos, a través de los alvéolos de los pulmones. Crecen adherente, como una monocapa, in vivo.

<span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">Las células epiteliales escamosas son positivas para la queratina, como se evidencia por la tinción con inmunoperoxidasa. <span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">Estas células también son capaces de sintetizar lecitina y contienen un alto porcentaje de ácidos grasos insaturados, que son utilizadas por la vía de la citidina-difosfo-colina importante para el mantenimiento de la membrana fosfolipidica de las celulas.



=<span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif; vertical-align: baseline;">PRINCIPALES USOS EN INVESTIGACIÓN O CLÍNICA =


 * Sirve para propósitos de estudio sobre crecimiento tumoral en distintas cepas experimentales, desarrollando así modelos que sean capaces de imitar enfermedades humanas.


 * Sirve para realizar un diagnóstico específico de enfermedades infecciosas.


 * Sirve para evaluar protocolos de infección para la observación de microorganismos infecciosos, en especial adenovirus.


 * Es comparable a línea BGM para cultivo de virus.


 * Es un hospedador adecuado para transfección.


 * Sirve para detectar citotoxicidad.


 * Sirve para detectar proteínas antitumorales.

=<span style="color: #333333; font-family: arial,helvetica,sans-serif;">**DESCUBRIMIENTOS IMPORTANTES REALIZADOS CON ESTA LÍNEA CELULAR** =


 * <span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">Explicación de la actividad antitumoral del té verde en base a proteinas de remoledación del DNA.


 * <span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">Tratamiento alternativo basado en electrodos para la cura del cancer de pulmón.


 * <span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">Determinación de los procesos a nivel celular y cómo se combinan estos para controlar la propagación de una infección vírica.


 * <span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">Demuestran como el humo de los cigarillos influyen sobre la modificación de las vías respiratorias inferiores.


 * <span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">Demostración de como afecta el hierro a la aparición de apoptosis en las células de la línea A549


 * La línea celular A549 ha servido para el estudio del efecto y mecanismos de infección del virus "Dengue".

=<span style="color: #333333; font-family: arial,helvetica,sans-serif;"> NIVEL DE BIOSEGURIDAD: 1 =

= = Los procedimientos adecuados de seguridad siempre se deben utilizar con este material. La seguridad en el laboratorio se discute en la publicación actual de la Bioseguridad en laboratorios microbiológicos y biomédicos de los EE.UU.

=<span style="color: #333333; font-family: arial,helvetica,sans-serif;">**ALMACENAMIENTO Y CRIOPRESERVACIÓN** =

<span style="color: #333333; font-family: arial,helvetica,sans-serif;">__<span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">Almacenamiento después de la extracción __

 * 1) Comprobar todos los contenedores en busca de fugas o roturas.
 * 2) Retirar las células congeladas del embalaje con hielo seco e inmediatamente colocar las células a una temperatura por debajo de -130 °C, de preferencia en vapor de nitrógeno líquido, hasta que esté listo para su uso.

<span style="color: #333333; font-family: arial,helvetica,sans-serif;">__<span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">Criopreservación __
Medio de crecimiento completo descrito anteriormente, suplementado con 5% (v/v) de DMSO.

=<span style="color: #333333; font-family: arial,helvetica,sans-serif;">(VÍDEO) PROLIFERACIÓN DE LA LÍNEA CELULAR A549 DE CARCINOMA DE PULMÓN HUMANO =

media type="youtube" key="4j-gF4I910U" width="560" height="315" =**BIBLIOGRAFÍA**=

<span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">1. Kobayashi K, Koyama K, Suzukawa M, Igarashi S, Hebisawa A, Nagase T et al. Epithelial-mesenchymal transition promotes reactivity of human lung adenocarcinoma A549 cells to CpG ODN. Allergology International. 2016;65:S45-S52.

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<span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">3. [Internet]. 2016 [cited 20 October 2016]. Available from: http://www.nanopartikel.info/files/methodik/VIGO/cell_culture_A549.pdf

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<span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">15. Lee C, Lee S, Han E, Kim S. Use of Cell Culture-PCR Assay Based on Combination of A549 and BGMK Cell Lines and Molecular Identification as a Tool To Monitor Infectious Adenoviruses and Enteroviruses in River Water. Environ Microbioloy. 2004;70(11):6695–6705.

<span style="font-family: Arial,Helvetica,sans-serif;">16. Hsu Y, Wang M, Ho L, Lai J. Dengue virus infection induces interferon-lambda1 to facilitate cell migration. Scientific Reports. 2016;6:24530.

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