HEK-293

=HEK-293=

toc La línea recibe el nombre de HEK-293 (Mientras HEK son las siglas de //Human Embryonic Cells,// el número hace referencia a que fueron obtenida del experimento 293avo de Frank Graham). Proceden de células embrionarias de riñón humano, recolectadas de un feto aparentemente sano abortado voluntariamente en Holanda en los años 70. Se trata de una línea celular usada muy frecuentemente en cultivos celulares, superada tan solo por las células HeLa [ ]. En general, se utilizan para producción biofarmacéutica y son muy populares en la producción de proteínas a pequeña escala y para la propagación de vectores de virus.[ ] 

1. Breve recuerdo histórico
Las células embrionarias fueron recolectadas de un feto sano, abortado legal y voluntariamente en Holanda en la década de los 70. Se desconoce la identidad de la madre y sus razones para abortar. Las líneas estables fueron generadas por transformación por el doctor Frank Graham y Van der Eb en la universidad de Lelden en 1973. En el articulo publicado [ ], se describe el proceso de transformación de las células de riñón embrionarias, las cuales se expusieron a fragmentos de ADNA de adenovirus tipo 5 y se realizó transfección con fosfato cálcico. Las células transfectadas mostraron algunas características de transformación, entre ellas la síntesis de un antígeno tumoral.

Graham describiría esta línea celular en 1977. En la descripción original Graham [ ] reportaría que las células son débilmente tumorigenicas, ya que solo indujo tumor a 3 de 20 animales a los que inoculó.

2. Caracterización de la línea celular
Según su ficha de ATCC, se trata de una línea celular hipotripoloide, tumorogenica. Uso de medio completo para su correcto crecimiento.. Esta línea celular tiene aplicación relacionadas con la expresión génica (hospedador para la transfección de genes). Por otra parte, presenta receptores de vitronectina, que promueve la adhesión y proliferación celular [ ]. El uso más común de esta linea es la producción virus y proteinas recombinantes.

3. Requerimientos para su mantenimineto

 * Medio completo:** EMEM (EBSS) + 2mM L-Glutamina +1% aminoácidos no esenciales 10% suero fetal bovino (FCS).
 * Almacenamiento**: Suplemento con 5-10% DMSO se preserva en Nitrógeno líquido en fase de vapor o a - 135ºC.
 * Atmósfera:** aire, 95% ; CO2, 5%
 * Temperatura:** 37 ºC

Se debe renovar el medio 2 o 3 veces por semana, y mantener el contaje de celulas entre 10^5 y 3x10^5 células/ml. Nunca se debe dejar que la concentración de células exceda las 10^6 células/ml, pues las células podrían comenzar a diferenciarse. [ ]

Las células podrán ser subcultiivadas por centrifugación y resuspensión en medio fresco.

4. Principales usos en investigación y descubrimientos
La línea celular HEK-293 es utilizada en varios estudios de bioquímica, sobre el uso de adenovirus como vectores. También son vehículos de expresión en proteínas recombinantes. Por otra parte, esta línea celular es empleada para producir grandes cantidades de VLP (partículas similares a virus) y constituir una alternativa prometedora como vacuna contra el virus de la influenza/gripe.

**__Principales usos en Investigación__**
Algunas de investigaciones llevadas acabo con las células HEK-293 son:


 * Efectos inhibitorios de hesperentina en canales de postasio Kv1.5 [ ]
 * Investigación en biocompatibilidad celular: efecto de single walled carbon microtubles. Puede inhibir el crecimiento de células HEK e inducir a la apoptosis y decrecer la capacidad de adhesión.[ ]
 * RELT (Tumor Necrosis Factor Receptor) induce a muerte celular en HEK-293. [ ]
 * La actividad antitumoral de las nuevas series de benzoxapezine en cáncer de mama. El componente activo causó inhibición del crecimiento en líneas celulares de cáncer de mama y no causó citotoxicidad a las células HEK. [ ]
 * Una alternativa a //E. coli// para la producción de proteínas intracelulares mamarias y de secreción. [ ]
 * miR-183-96-182 cluster es sobreexpresado en el tejido prostático y regula la homeostasis de zinc en las células de próstata. Se observó la regulación de la homeostasis de zinc por este clúster en células de próstata y en HEK-293, sugeriendo un mecanismo universal que no es específico para la próstata.[ ]
 * Producción de glicoproteínas recombinantes de membrana y secreción. [ ]
 * Preparación, caracterización e investigación toxicológica de cobre cargado con nanopartículas de quitosano en las células humanas embrionarias de riñón HEK-293.[ ]
 * Efecto protector de N-acetilcisteína contra el daño del ADN y la detección de la fase S inducida por ocratoxina A en células de riñón embrionario humano ( HEK-293).[ ]

__Principales descubrimientos de la línea__

 * Desarrollo de nuevas vacunas contra la gripe. [ ]
 * Vehículo de expresión de proteínas recombinantes. [ ]
 * Estudios de bioquímica, sobre el uso de adenovirus como vectores.
 * Caracterización de receptores de sabor para edulcorantes.

5.Referencias
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[2] [HEK-293] (ATCC® CRL-1573™) https://www.lgcstandards-atcc.org

[3] HEK-293 Cell Line https://www.hek293.com

[4] GRAHAM, F L, SMILEY, J, RUSSELL, W C and NAIRN, R. Characteristics of a human cell line transformed by DNA from human adenovirus type 5. The Journal of general virology [online]. 1977, vol. 36, no. 2977, pp. 5974. ISSN 0022-1317

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